AFT GelGreen plus 核酸染料(EB替代品,更适合蓝光切胶仪)

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 【产品简介

AFTGreen plus(等同于GelGreen)是AFT开发的升级版花菁类新型核酸染料。AFTGreen plus将花菁素基体苯环改良成链式结构的油性大分子,这种独特的油性大分子,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,也不易挥发而被吸入人体,且在凝胶染色浓度下没有诱变性,具有使用安全无毒、检测灵敏等特点。同时改善了花菁素类核酸染料电泳条带弯曲和迁移的缺点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色。与标准蓝光可见光激发的凝胶观察装置完美兼容,适用于蓝色可见光激发的凝胶观察和安全切胶(因为激发波长不匹配的缘故,该染料在紫外凝胶成像系统下比较暗,不建议用于紫外扫胶仪),是一种安全无毒、高灵敏的全新核酸染料。

 

 

 

产品特点

1. 安全无毒: 独特的油性大分子特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明该染料的 诱变性远小于 EB

 

2. 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响较小。

 

3. 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

 

4. 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

 

5. 操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用蓝光可见光凝胶透射仪观察。

 

6. 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNAssDNARNA 染色。

 

7. 完美兼容:适用于使用 254nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。

 

 

 

注意事项

 

1. 由于AFTGreenplus 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加, 而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选 择将AFTGreen plus储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。AFTGreen plus兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

 

2. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。

 

3. AFTGreen plus对玻璃器皿和非聚丙烯材料具有一定的亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

 

4. 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

 

 

 

 

 

 

 

操作步骤

 

 

一、胶染法(前染法)

 

1.按常规操作,制备琼脂糖凝胶,加入浓缩的10000X AFTGreen plus 使其在凝胶中的终浓度为1X (比如,制备100ml凝胶,加入染料10μl,可根据实际情况调整用量),轻轻摇匀,倒胶。

 

2. 因为非常灵敏,电泳过程中 DNA marker 上样量只需1-2ul,而不是EB电泳中的5ul,请严控DNAmarker上样量。

 

3. 按常规方法电泳,观测结果。

 

 

 

二、泡染法(后染法)

 

1. 按照常规方法进行电泳。

 

2.用dH2O10000X AFTGreen plus浓缩液稀释约3300倍到0.1MNaCl中,制成3X染色液。(比如,将15μl 10000X AFTGreen plus浓缩液和5ml 1M NaCl加到45ml dH2O中)。

 

3. 将凝胶小心放入合适的容器中,缓慢加入足量的3X染色液浸没胶。室温振荡染色约30min,最佳染色时间根据凝胶厚度及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于3.5-10%丙烯酰胺胶,染色时间通常介于30min1小时。然后观测结果。


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