【储存条件】 -20˚C
【产品简介】
本产品包含高纯度AFT Taq HiFi DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为2×。AFT Taq HiFi DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低（保真性是Taq酶的2-4倍），具有扩增速度快（5-10秒1kb）、扩增片段长（>3kb）、特异性强且适应性广等优点。可最大限度地减少人为误差，可用于高特异性PCR反应及GC含量较高（>60%）具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的3’端附有一个突出的"A"碱基，纯化后可直接用于TA 载体克隆(货号AFT2005-01或AFT2007-01)。 本产品有含蓝色染料，在PCR 反应完成后，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程，其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500 bp 双链DNA 片段相近。
【产品组份】
AFT2001-10 AFT2001-50 AFT2001-100
2X AFT Taq HiFi PCR mix (with blue dye) 10x1ml 50x1ml 100x1ml
【适用范围】
1.基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物，如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析（SNP）等。
【所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板、引物和蒸馏水等。
【操作示例】 | |
按下表配制PCR反应体系（冰上操作）: | |
Template DNA* | <1µg |
2X AFT Taq HiFi PCR mix (with blue dye) | 10 μl |
Primer 1 (10 μM) | 0.5 µl |
Primer 2 (10 μM) | 0.5 µl |
Nuclease-free ddH2O补足至 | 20 µl |
建议的PCR条件： |
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95°C | 3 min. |
32-36 cycles of: |
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94°C | 25 sec. |
55–64°C | 25 sec. |
72°C | 5-10sec**. /1 kb DNA |
72°C | 5 min. |
4°C | forever |
<*模板量：10~1000 ng 基因组 DNA，1~30 ng 质粒，或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系>。
<**扩增速度：对于高gc或者高AT模板、粗提制备模板，适当降低延伸速度对PCR成功率有提高，对于上述三种情况，建议10-15sec/kb>。
