AFT Site-Directed Mutagenesis Kit 超高效点突变试剂盒

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【储存条件】

长期保存，请置于-20˚C，有效期24个月。

【产品简介】

本试剂盒用于克隆在质粒上的DNA序列的定点编辑，可实现快速高效的密码子突变、插入或缺失等改变，支持大片段序列的插入和删除，配合推荐的引物设计方法，突变效率可达100%。只需通过AFT-Mutase酶进行目的质粒扩增和AFT-Remase 酶清除原始质粒模板，产物转化大肠杆菌感受态细胞即可得到目的载体的克隆，操作简单方便。本试剂盒采用的高速超保真酶AFT-Muta可极大缩短PCR时间，可用于10-20kb的质粒的定点突变，只需1天即可完成目的基因的定点编辑，可以广泛应用于基因及蛋白质的功能研究。

【产品组分】

      组分名称                     10 T   

2× AFT-Mutase Mix                  110 μl     

AFT-Remase (10U/μl)                 10 μl      

10× AFT-Remase Buffer               25 μl      

【引物设计】

推荐使用“非对称”的引物设计方法，即突变位点不要位于两条引物的中央，而是采取下图1的排布方式，保证两条突变引物的3’端与原始质粒完全匹配的序列的Tm值均达到58-68°C。图1中所示为将原始质粒上AT替换为GC，引物的上引入突变位点的位置更靠近5’端，使两条引物的5’端相重叠的序列的Tm值达到48-53°C；同理设计插入和删除突变的引物。如对引物设计不熟悉，推荐采取在线引物设计：http://ps.biocloud.org.cn/。