【储存条件】 长期保存,请置于4˚C (切勿结冰冻住)。
【产品简介】
AFT Lipo3000 Transfection Reagent中包含了脂质体纳米颗粒技术,能够提供卓越的转染性能,改善相关应用的结果及可重复性。此试剂具有优异的转染效率,并可提高细胞活性,广泛适用于难转染的及常见的细胞种类(例如HEK293和Hela细胞)。在对生物学研究相关的广泛细胞种类实施成功转染的过程中,本试剂可:
• 提供卓越的性能——我们针对难以转染的细胞种类实现了最高转染效率的试剂 (其可高效转染的细胞类型包括:成纤维细胞(3T3、COS-7),成肌细胞(C2C12、L6 CRL-1458),肝细胞(HepG2、HuH7),红白血病细胞(K562),乳腺癌(MCF7、Hs578T),前列腺癌(LNCap),肺癌细胞(A549、NCI-H460),骨肉瘤细胞(U-2 OS、Saos-2),结肠癌细胞(Caco2、SW480),胰腺癌细胞(PANC-1),皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-28)。
• 提高细胞活性——对细胞作用温和,毒性很低(本脂质体用量在很宽的动态范围内均能保持很高的转染效率,可按需进行简便快速的条件优化。在需要将细胞损伤降至最低的相关应用中,建议使用低毒的脂质体用量)。
• 功能多样——同时适用于DNA、RNA及共转染应用(本脂质体用于新型基因组编辑的相关应用。通过高效率的转染,它能够增加TALEN或CRISPR系统剪切和重组的成功概率,最终使得基因修饰的效率实现最大化,并简化后续处理步骤)。
【产品组分】
AFT2019-01
AFT Lipo3000 Transfection Reagent(红色盖) 0.25 ml
AFT P-3000 Reagent (黄色盖) 0.25 ml
【实验前准备】
• 质粒DNA (0.5–5 μg/μL储液)
• Opti-MEM®减血清培养基
• 微量离心管
【操作步骤】
A、Super Lipo3000 DNA Transfection Reagent 需要量(具体方法见后面)
Component 96-well 24-well 6-well
Final DNA per well 100 ng 500 ng 2500 ng
Final Lipo3000 Reagent per well 0.2–0.5 μL 1.0–2.5 μL 5.0–12.5 μL
Final P-3000 Reagent per well 0.2 μL 1.0 μL 5.0 μL
B、Transfection of siRNA
转染siRNA至细胞中时,遵循如上所述的DNA实验方案,但在稀释siRNA时不要加入P-3000 (第3步)。
C、Super Lipo3000 DNA Transfection Reagent Protocol(具体方法)
按照下表转染细胞,使用指定体积的DNA和P-3000试剂以及对应的两种体积的Super Lipo3000(优化时)。每种反应混合物体积为单个孔的体积,且考虑了移液差异。按比例计算其他孔的体积。