【储存条件】 -20˚C
【产品简介】
本产品包含最高纯度Best AFT High-Fidelity DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为2×。Best AFT High-Fidelity DNA聚合酶比普通Taq酶扩增效率高、错配率低（其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的100倍以上、Pfu DNA Polymerase的6倍），同时该酶具有快速的DNA合成速度(15秒/kb)，而且灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差，可用于高特异性PCR反应及GC含量较高（>60%）具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物的3’端没有突出的"A"碱基，纯化后可用平末端载体克隆(货号AFT2006或AFT2007)。 本产品含红色染料，在PCR 反应完成后，不需添加上样缓冲液就能上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。
【产品组份】
AFT2003-01 AFT2003-10
Best AFT High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) 1ml 10x1ml
【质量控制】
以质粒为模板，能有效扩增>20 kb的DNA片段；以基因组DNA为模板，能有效扩增>15kb DNA片段；无内切酶和外切酶污染。
【适用范围】
1.基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。
2.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物，如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析（SNP）等。
【所需试剂】使用者仅需准备PCR反应的模板、引物和蒸馏水等。
【操作示例】 | |
按下表配制PCR反应体系（冰上操作）: | |
Template DNA* | <1µg |
Best AFT High-Fidelity DNA Polymerase PCR mix (2X) | 10 μl |
Primer 1 (10 μM) | 0.5 µl |
Primer 2 (10 μM) | 0.5 µl |
Nuclease-free ddH2O补足至 | 20 µl |
建议的PCR条件： |
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98°C | 30sec.-3 min. |
30-35 cycles of: |
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98°C | 5-10 sec. |
50–64°C | 10-30 sec. |
72°C | 10-15sec./1kb |
72°C | 5 min. |
保持 4°C forever |
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<*模板量：10~1000 ng 基因组 DNA，1~30 ng 质粒，或 1~2 μl RT-PCR 反应后的 cDNA。以上举例为常规 PCR 反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。
**扩增速度：在粗提物做模板或者模板具有复杂序列的情况下，把延伸速度改成30-60sec../kb扩增效率会有很大改善。>
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。
